信帆生物告訴您：葡聚糖凝膠填料的使用方法

使用方法

1.凝膠預(yù)溶脹

在凝膠使用前，首先將其溶脹，具體方法：室溫下，將干粉浸泡在超純水中充分溶脹24小時(shí)，并不斷攪拌保證凝膠 充分溶脹；或者在室溫下，將干粉浸泡在50-60%乙醇中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠*溶脹，用超純水洗去乙醇；

2.裝柱

將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性注入柱內(nèi)，注意要避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或者斷層，保持濕態(tài)裝柱，可在凝膠可承受的操作壓下裝柱，保證裝柱均勻，裝完柱可以檢測柱效，檢查凝膠裝填是否合格。

3.平衡

上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到基線平穩(wěn)；

4.上樣

凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，初次上樣建議控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可

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5.洗脫方法

可以用無鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化；

6.在位清洗（CIP）

凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

7.保存

凝膠使用完后，可將其回收，可將凝膠用超純水沖洗干凈并濾干，加入0.02%的疊氮鈉做為防腐劑，或者浸泡在20%的乙醇中，防止長菌。

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